Y迷宮實(shí)驗(yàn)材料 大鼠 小鼠

儀器、耗材 Y-迷宮由三等分輻射式迷路箱   控制儀

一、Y迷宮實(shí)驗(yàn)方法

1． 篩（預(yù))選

（1）將大鼠放入Y-迷宮箱中適應(yīng)3～5 min后，給予適當(dāng)電刺激至其對(duì)3臂均探索進(jìn)入為止。選擇活躍，對(duì)電刺激反應(yīng)較敏感，逃避反應(yīng)迅速者供測(cè)試用。淘汰反應(yīng)過(guò)于遲鈍或特別敏感的大鼠。

（2）預(yù)選出達(dá)到電刺激次數(shù)≤3次時(shí)連續(xù)2次正確反應(yīng)的動(dòng)物，即對(duì)電刺激反應(yīng)較敏感的大鼠供實(shí)驗(yàn)用。

（3）在上述初步篩選的基礎(chǔ)上，通過(guò)正式迷宮訓(xùn)練，淘汰達(dá)不到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)(學(xué)不會(huì))的大鼠。

2． 正誤判定的標(biāo)準(zhǔn)

大鼠受電刺激后從起步區(qū)直接逃到安全區(qū)或通電后10s內(nèi)一次性跑向安全區(qū)為“正確反應(yīng)”，若逃到無(wú)燈光的另一臂，則記為錯(cuò)誤反應(yīng)。

3． 達(dá)標(biāo)（學(xué)會(huì)）標(biāo)準(zhǔn)

（1）連續(xù)10次中有9次或以上正確反應(yīng)(正確反應(yīng)率≥90％)定為學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)。

（2）每個(gè)實(shí)驗(yàn)日進(jìn)行20次訓(xùn)練測(cè)試，錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)（errors number EN）≤2次。全天總反應(yīng)時(shí)間（total reaction time TRT）≤120s作為判定大鼠學(xué)會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)镋N反映大鼠反應(yīng)的正確程度，TRT反映大鼠反應(yīng)時(shí)間的長(zhǎng)短，可綜合評(píng)價(jià)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，因而此標(biāo)準(zhǔn)更為合理。

以上為每只大鼠達(dá)標(biāo)(學(xué)會(huì))標(biāo)準(zhǔn)，全組大鼠達(dá)標(biāo)(學(xué)會(huì))標(biāo)準(zhǔn)為全組正確率(學(xué)會(huì)動(dòng)物數(shù)／該組動(dòng)物總數(shù)×)達(dá)85％ 以上。

4． 學(xué)習(xí)測(cè)試

實(shí)驗(yàn)時(shí)先將大鼠放入迷宮中適應(yīng)3～5 min，然后再開(kāi)始正式實(shí)驗(yàn)。

（1）隨機(jī)休息法：安全區(qū)以無(wú)規(guī)則次序變換，以訓(xùn)練大鼠辨別燈光刺激及安較好的的能力，大鼠受電刺激后逃到安全區(qū)后，燈光繼續(xù)作用10～15s，熄燈后結(jié)束一次測(cè)試，大鼠所在支臂就作為下一次測(cè)試的起點(diǎn)，兩次測(cè)試時(shí)間間隔為30s或休息1 min 后再予以第2次測(cè)試，依次重復(fù)，測(cè)試至達(dá)連續(xù)9／10標(biāo)準(zhǔn)。

（2）隨機(jī)不休息法：安全區(qū)以無(wú)規(guī)則的次序變換開(kāi)始時(shí)，對(duì)大白鼠所在支臂與另一支臂通電，動(dòng)物在電刺激下逃竄至燈光區(qū)后再保持l0s或30s為一次測(cè)試。然后動(dòng)物所在支臂為下次測(cè)試的起始位置進(jìn)行下一次測(cè)試。

（3）順序法：三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂輪流作為起步區(qū)或安全區(qū)。

以上方法還可以分為兩類(lèi)：①每天固定訓(xùn)練次數(shù)，一般是20次，連續(xù)訓(xùn)練3～4 d。大鼠一般都能達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)。②不固定訓(xùn)練次數(shù)，采用分段連續(xù)訓(xùn)練法，即每訓(xùn)練10次，休息1 min，連續(xù)訓(xùn)練直到學(xué)會(huì)為止，訓(xùn)練在1 d內(nèi)完成。

5． 記憶保持（再現(xiàn)）測(cè)試

學(xué)習(xí)測(cè)試24 h、48 h、1周、30 d后，再以同樣方法測(cè)試至9／10標(biāo)準(zhǔn)，正確反應(yīng)次數(shù)定為A，以A／10表示記憶的保持能力，此值越高說(shuō)明記憶力越好。

二、觀察指標(biāo)

1. 達(dá)標(biāo)所需的訓(xùn)練次數(shù)(電刺激次數(shù)、反應(yīng)次數(shù)、測(cè)試次數(shù))：用動(dòng)物學(xué)習(xí)達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)前所需的測(cè)試數(shù)，表示其空間分辯反應(yīng)的學(xué)習(xí)記憶成績(jī)。

2. 達(dá)標(biāo)所需的天(日)數(shù)：記錄每只大鼠達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)所用的日數(shù)。

3. 錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)(errors number EN )：一個(gè)實(shí)驗(yàn)日完成所有反應(yīng)中錯(cuò)誤反應(yīng)的次數(shù)。

4. 全天總反應(yīng)時(shí)間(total reaction time TRT)：動(dòng)物的反應(yīng)時(shí)(潛伏期)指從信號(hào)燈亮開(kāi)始至大鼠第1次逃至燈亮區(qū)為止所耗的時(shí)間，全天總反應(yīng)時(shí)是一個(gè)實(shí)驗(yàn)日(全天)完成所有反應(yīng)(包括正確反應(yīng)和錯(cuò)誤反應(yīng))所需時(shí)間。

5. 主動(dòng)回避率：大鼠在燈亮后但未通電的5s內(nèi)完成逃避反應(yīng)的次數(shù)占總反應(yīng)次數(shù)的百分率。安全區(qū)燈亮，電刺激尚未開(kāi)始時(shí)，大鼠即逃往安全區(qū)表明大鼠已經(jīng)形成了明暗辨別條件反射(主動(dòng)回避反應(yīng))。

6. 正確反應(yīng)率(行為正確率)：正確反應(yīng)數(shù)占總測(cè)試數(shù)的百分比。

7. 全組正確率：學(xué)會(huì)動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分比。

8. 3d學(xué)會(huì)率：訓(xùn)練第3d達(dá)學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分比。動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分比。