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糖尿病腎病模型構(gòu)建
更新時(shí)間：2024-07-25
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糖尿病腎病模型構(gòu)建
一、糖尿病腎病背景簡(jiǎn)介
糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN） 是糖尿病主要的慢性并發(fā)癥之一，也是導(dǎo)致終末期腎病的主要原因。控制血糖及血壓能夠減緩糖尿病患者向終末期腎病轉(zhuǎn)化，但目前臨床上尚缺乏新的治療方法醫(yī)治糖尿病腎病。建立適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型，可以為研究DN的病因、發(fā)病機(jī)制和病理生理改變提供重要的線索，同時(shí)也為臨床治療DN提供理論依據(jù)。
二、糖尿病腎病模型簡(jiǎn)介
糖尿病腎病模型是用于研究糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制、病理生理改變以及評(píng)估治療方法的工具。這類(lèi)模型主要分為誘發(fā)性模型、自發(fā)性模型和基因工程小鼠模型。
三、糖尿病腎病模型構(gòu)建方法
1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
SD大鼠 200g左右
2. 實(shí)驗(yàn)材料
高脂飼料，STZ，檸檬酸鈉緩沖液
3. 化學(xué)藥物誘導(dǎo)DN模型制備流程
適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，將普通飼料更換為高脂飼料，繼續(xù)飼養(yǎng)8周后，禁食不禁水12h，記錄小鼠的體重和空腹血糖值。根據(jù)小鼠體重，腹腔注射STZ溶液，造模7天后，尾部取血測(cè)量空腹血糖。若血糖值≥11.1mmol/L視為糖尿病造模成功。繼續(xù)給予糖尿病小鼠高脂飼料飼養(yǎng)4~8周。隨病程延長(zhǎng)，后期可出現(xiàn)腎間質(zhì)小血管玻璃樣變等腎小管及間質(zhì)病理改變，模型鼠尿蛋白排泄率增加。
4. 模型驗(yàn)證
1、實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天，用代謝籠收集24h尿蛋白、尿肌酐。次日以1%戊bbt納麻醉，從心臟采血，檢測(cè)血肌酐、血尿素氮等指標(biāo)。并按照公式計(jì)算內(nèi)聲肌酐清除率（Ccr=尿肌酐/血肌酐*24h尿量）。
2、腎組織病理學(xué)檢測(cè)：處死大鼠取右腎，4%多聚甲醛固定，乙醇逐級(jí)脫水，石蠟包埋切片，常規(guī)HE及PAS染色，樹(shù)膠固封，光鏡下觀察腎小球毛細(xì)血管叢呈分葉狀，細(xì)胞外基質(zhì)增多，系膜區(qū)擴(kuò)大。
四、小結(jié)
人類(lèi)糖尿病以2型占多數(shù)，因此建立理想實(shí)用的2型糖尿病動(dòng)物模型，對(duì)其發(fā)病機(jī)制及其慢性并發(fā)癥的研究具有重要意義。高糖高脂+小劑量STZ造成DM模型，然后依其自然病情發(fā)展成DM模型。
五、參考文獻(xiàn)
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