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小鼠腫瘤模型構建
更新時間：2025-07-02
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廠商性質(zhì)：其他
一、小鼠腫瘤模型構建類型選擇
| 模型類型 | 適用研究 | 周期 | 優(yōu)缺點 |
|---|---|---|---|
| 移植瘤模型 | 藥物篩選、免疫治療 | 2-6周 | 操作簡單，但微環(huán)境不完整 |
| 基因工程模型（GEMM） | 腫瘤發(fā)生機制、靶向治療 | 3-12個月 | 自發(fā)成瘤，接近人類腫瘤但成本高 |
| 化學/物理誘導 | 環(huán)境致癌機制 | 2-6個月 | 多階段成瘤，適合特定癌種（如肝癌、肺癌） |
二、小鼠腫瘤模型構建移植瘤模型（皮下/原位）
1. 細胞來源
細胞系：4T1（乳腺癌）、B16-F10（黑色素瘤）、HCT116（結腸癌）等。
患者來源異種移植（PDX）：將患者腫瘤組織移植至免疫缺陷鼠（NSG小鼠）。
2. 操作步驟（皮下移植）
細胞準備：
對數(shù)生長期細胞，胰mei消化后PBS重懸（活力＞90%）。
調(diào)整濃度：1×10?~1×10? cells/mL（根據(jù)細胞類型調(diào)整）。
接種：
小鼠腋下或背部皮下注射100-200μL細胞懸液（27G針頭）。
監(jiān)測：
每2-3天測量腫瘤長徑（L）和短徑（W），體積公式：V = 0.5×L×W2。
終點：腫瘤體積≥1000mm3或出現(xiàn)潰瘍。
3. 原位移植（以肝癌為例）
手術暴露肝臟：麻醉后左肋下切口，暴露肝左葉。
注射細胞：緩慢注入50μL HepG2細胞懸液（5×10? cells）。
縫合監(jiān)測：術后鎮(zhèn)痛，4周后Micro-CT評估腫瘤負荷。
三、基因工程自發(fā)模型（以KPC胰腺癌模型為例）
1. 轉(zhuǎn)基因小鼠
品系：LSL-Kras?12?/+; Trp53?1?2?/+; Pdx1-Cre（KPC模型）。
誘導：Cre重組酶激活突變基因，胰腺自發(fā)成瘤（8-12周）。
2. 監(jiān)測
超聲：檢測胰腺腫塊（≥3mm為陽性）。
血清標志物：CA19-9（胰腺癌）、AFP（肝癌）。
四、化學誘導模型（以DEN誘導肝癌為例）
Day 1：
14日齡小鼠腹腔注射二乙基亞硝胺（DEN，25 mg/kg）。
Week 6-8：
飼喂含0.05%二乙基己xi雌酚（DEN-promoter）飼料。
Week 20-30：
解剖觀察肝腫瘤結節(jié)，計數(shù)并測量大小。
五、關鍵評估方法
1. 影像學
小動物超聲：高頻探頭（≥30MHz）測腫瘤血流信號。
活體熒光成像（IVIS）：適用于熒光標記細胞（如Luciferase）。
2. 病理學
HE染色：評估腫瘤分化程度、壞死區(qū)域。
免疫組化：Ki67（增殖）、CD31（血管生成）、TUNEL（凋亡）。
3. 免疫微環(huán)境分析
流式細胞術：檢測腫瘤浸潤淋巴細胞（CD8+ T細胞、Treg）。
