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CDX模型構(gòu)建
更新時(shí)間：2025-07-11
訪問(wèn)量：380
廠商性質(zhì)：其他
一、CDX模型構(gòu)建的核心特點(diǎn)
| 對(duì)比項(xiàng) | CDX模型 | PDX模型 |
|---|---|---|
| 細(xì)胞來(lái)源 | 腫瘤細(xì)胞系（如A549、HCT116） | 患者新鮮腫瘤組織 |
| 構(gòu)建周期 | 2–6周 | 3–12個(gè)月 |
| 成本 | 低 | 高 |
| 應(yīng)用場(chǎng)景 | 藥物篩選、機(jī)制研究 | 個(gè)體化治療、臨床轉(zhuǎn)化研究 |
二、CDX模型構(gòu)建流程
1. 腫瘤細(xì)胞準(zhǔn)備
細(xì)胞系選擇：
肺癌：A549（非小細(xì)胞肺癌）、H1975（EGFR突變）
結(jié)直腸癌：HCT116、SW480
乳腺癌：MCF-7（ER+）、MDA-MB-231（三陰性）
常用細(xì)胞系（示例）：
需定期STR鑒定，避免交叉污染。
細(xì)胞培養(yǎng)：
使用含10% FBS的培養(yǎng)基（如DMEM/RPMI-1640），傳代至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
胰m消化后計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度（通常1×10?–5×10? cells/mL）。
2. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
免疫缺陷鼠：
裸鼠（BALB/c nude）：T細(xì)胞缺陷，適合大多數(shù)實(shí)體瘤。
NSG（NOD-scid IL2Rγ?/?）：高度免疫缺陷，適合低成瘤性細(xì)胞。
飼養(yǎng)環(huán)境：SPF級(jí)屏障系統(tǒng)，避免感染。
3. 移植方法
(1) 皮下移植（最c用）
步驟：
麻醉小鼠（異f烷或腹腔注射戊巴b妥鈉）。
背部或側(cè)腹皮膚消毒（酒精+d伏）。
皮下注射腫瘤細(xì)胞懸液（100–200 μL，含1×10?–5×10? cells）。
觀察注射部位是否形成明顯皮丘（避免漏液）。
優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，易于監(jiān)測(cè)腫瘤體積。
(2) 原位移植（模擬腫瘤微環(huán)境）
示例：
肝癌：脾臟注射（細(xì)胞遷移至肝）。
肺癌：氣管內(nèi)注射或尾靜脈注射（肺轉(zhuǎn)移模型）。
乳腺癌：乳腺脂肪墊注射（4號(hào)乳頭周圍）。
優(yōu)點(diǎn)：更接近臨床病理特征，但手術(shù)難度較高。
(3) 尾靜脈注射（轉(zhuǎn)移模型）
注射1×10?–1×10? cells（100 μL PBS），4–6周后解剖檢測(cè)肺/肝轉(zhuǎn)移灶。
4. 模型監(jiān)測(cè)與數(shù)據(jù)分析
腫瘤體積測(cè)量：
游標(biāo)卡尺測(cè)量長(zhǎng)徑（L）和短徑（W），按公式計(jì)算：
每周測(cè)量2–3次，體積達(dá)1000–1500 mm3時(shí)需終止實(shí)驗(yàn)（倫理限制）。
終點(diǎn)指標(biāo)：
腫瘤重量：解剖后稱重。
組織學(xué)分析：H&E染色、Ki-67（增殖）、TUNEL（凋亡）。
分子檢測(cè)：qPCR/WB檢測(cè)靶基因表達(dá)。
三、CDX模型的應(yīng)用
1. 抗腫瘤藥物篩選
分組設(shè)計(jì)：對(duì)照組（PBS）、實(shí)驗(yàn)組（化療藥/靶向藥）。
評(píng)價(jià)指標(biāo)：抑瘤率（）、生存期。
2. 基因功能研究
構(gòu)建穩(wěn)定敲除/過(guò)表達(dá)細(xì)胞系（如CRISPR-Cas9），比較成瘤能力差異。
3. 免疫治療模型（需人源化小鼠）
共移植人PBMC或免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如抗PD-1抗體）。
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案
| 問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 腫瘤不成瘤 | 細(xì)胞活性低/接種量不足 | 提高細(xì)胞數(shù)（5×10? cells），改用NSG小鼠 |
| 腫瘤生長(zhǎng)不均勻 | 注射技術(shù)不穩(wěn)定 | 統(tǒng)一由同一操作者注射，避免氣泡 |
| 動(dòng)物死亡或感染 | 手術(shù)創(chuàng)傷/無(wú)菌操作不當(dāng) | 術(shù)后抗生素預(yù)防（如恩n沙星） |
