穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

簡要描述：

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選
通過慢病毒感染配合藥物篩選的方法獲得穩(wěn)定表達(dá)Oct-4-EGFP的LELA穩(wěn)定細(xì)胞株

更新時間：2023-10-30

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穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實(shí)驗(yàn)原理外源基因在細(xì)胞中的表達(dá)可分為兩大類，一類是瞬時表達(dá)，一類是穩(wěn)定表達(dá)（又叫長久表達(dá)）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上，使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因。建立穩(wěn)定細(xì)胞株，一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的**對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。

實(shí)驗(yàn)流程1、載體構(gòu)建（表達(dá)質(zhì)粒載體、病毒載體）；2、轉(zhuǎn)染/感染；3、目的蛋白初步檢測；4、***篩選；5、目的蛋白再次檢測（定性/半定量）；6、單克隆細(xì)胞株穩(wěn)定性檢測。四、客戶提供培養(yǎng)好的細(xì)胞五、公司提供：基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)周期：大約3-4月左右，具體需要根據(jù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn)，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺近1000平方米，擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米，可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)團(tuán)隊(duì)主要來自中國科學(xué)院大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu)，能夠?yàn)榭蛻籼峁┭芯糠桨覆邉?、?xiàng)目實(shí)施及項(xiàng)目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項(xiàng)目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。