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RT-PCR技術(shù)服務
簡要描述：
RT-PCR技術(shù)服務，反轉(zhuǎn)錄·聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（reverse transcription ）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。
更新時間：2024-08-06
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廠商性質(zhì)：其他
RT-PCR技術(shù)服務的核心步驟包括：
RNA提?。簭慕M織或細胞等樣本中提取RNA，確保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染。
反轉(zhuǎn)錄（RT）：在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以RNA為模板合成cDNA的第一鏈。這一步驟通常使用隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物中的一種。
PCR擴增：以cDNA為模板，在DNA聚合酶的作用下進行PCR擴增，得到目的片段。
RT-PCR技術(shù)服務的注意事項：
避免RNA酶污染：RNA酶會降解RNA，影響實驗結(jié)果。因此，在操作過程中應使用RNA酶抑制劑，并確保所有器皿和試劑無RNA酶污染。
選擇合適的引物：引物的選擇對實驗結(jié)果至關(guān)重要。應根據(jù)實驗的具體情況選擇合適的引物，如隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物。
控制反應條件：不同來源的逆轉(zhuǎn)錄酶反應溫度有所不同，應根據(jù)所選逆轉(zhuǎn)錄酶的要求設(shè)置合適的反應條件。
RT-PCR技術(shù)服務的應用：
基因表達研究：通過檢測細胞中特定基因mRNA的含量，可以評估該基因的表達水平。
病毒檢測：RT-PCR技術(shù)可用于檢測細胞中的RNA病毒，如SARS-CoV-2等。
基因克隆：通過RT-PCR技術(shù)可以直接克隆特定基因的cDNA序列，為后續(xù)的基因功能研究提供基礎(chǔ)
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